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文檔簡介
1、離子液體被認為是一種綠色溶劑。離子液體本身的一些物理性質(zhì)如下:蒸汽壓為零,熱穩(wěn)定性較好不易變性。溶菌酶的分子量只有14.4 kDa,有129個氨基酸殘基,兩個結構域,所以經(jīng)常被用為模型蛋白來研究蛋白質(zhì)的一些結構。
本文中運用了傅里葉變換紅外光譜,二維相關紅外光譜,紫外光譜,熒光光譜等,從不同的側(cè)面來研究離子液體與溶菌酶的相互作用。另外還從酶活的角度來研究蛋白質(zhì)與離子液體的相互作用。
在酶活實驗中,考察了pH,
2、離子液體的種類,離子液體的濃度對溶菌酶活性的影響。最后實驗條件選為pH=6.23和pH=5.02,兩種水溶性的離子液體[Bmim][otf]和[Bmim][BF4],實驗濃度為150mM,并運用于紅外光譜中。
在紅外光譜中研究了三個反應體系:
(1)溶菌酶在不同pH值的重水緩沖溶液中的結構變化。
(2)在溶菌酶中加入[Bmim][otf],研究在不同pH的重水緩沖溶液中溶菌酶二級結構的變化。
3、r> (3)在溶菌酶中加入[Bmim][BF4]。
研究在不同pH重水緩沖溶液中溶菌酶的二階結構的變化。分別運用傅里葉紅外光譜,二階導數(shù)光譜,差示光譜,二維紅外相關光譜研究了溶菌酶與離子液體相互作用的氨基酸殘基以及二級結構的變化,研究發(fā)現(xiàn),在不同的pH值以及離子液體種類下,二級結構α螺旋與β折疊的變化順序是不一樣的,結合溶菌酶的活性研究發(fā)現(xiàn)這樣的變化順序跟溶菌酶的活性有一定的關聯(lián)性,并且氨基酸殘基Arg與無規(guī)則卷曲跟
4、離子液體相互作用較強。
在紫外光譜中225 nm附近,溶菌酶的峰強下降,峰位紅移,280 nm附近的峰強和峰位變化不大,說明離子液體對溶菌酶的骨架影響較大,對帶有芳香環(huán)的氨基酸殘基影響不大。
在熒光光譜實驗中研究了兩個反應體系:
(1)以[Bmim][otf]為淬滅劑的溶菌酶的熒光光譜。
(2)以[Bmim][BF4]為淬滅劑的溶菌酶的熒光光譜。
通過Stern-Vo
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