慢性乙型肝炎患者特異性T淋巴細胞的功能及抗病毒治療對其影響.pdf

1、目的： 探討慢性乙型肝炎病毒(CHB)患者外周血HLA—A2限制性HBcAg特異性細胞毒性T淋巴細胞(CTL)的功能及抗病毒治療對其影響。 方法： 研究對象共216人，分顯性感染組、隱性感染組、攜帶組和對照組四組。其中顯性感染組73例為臨床診斷慢乙肝患者；隱性感染組60例為無肝病史、無乙肝疫苗接種史，肝功能生化檢測始終正常，HBV DNA陰性，血清學抗HBs陽性，及抗HBc和/或抗HBe陽性者；攜帶組53例為無癥

2、狀HBV DNA陽性者；對照組30例為健康獻血員。所有研究對象采集靜脈血，分離單個核細胞，采用流式細胞術直接免疫熒光法檢測各組HLA—A2基因分布頻率；以HBcAg18-27V和HBcAg18-27I兩條多肽分別刺激各組HLA—A2陽性者外周血單個核細胞(PBMC)，用ELISPOT酶聯(lián)免疫斑點法檢測刺激PBMC后分泌IFN—γ的陽性斑點數(shù)；顯性感染組HLA—A2陽性者接受52周的核苷(酸)類藥物抗病毒治療，于治療前、后分別檢測血清乙肝

3、病毒感染標記物和血清ALT、HBV—DNA，根據(jù)檢測結果將接受治療者分為不完全應答組和完全應答組；ELISPOT法檢測兩組PBMC對HBcAg18-27V和HBcAg18-27I兩條多肽刺激后分泌IFN—γ的陽性斑點數(shù)，分析比較兩組間治療后和治療前、后各組平均反應強度應答變化。 結果： 1．顯性感染組HLA—A2基因分布頻率為52.1％(38/73)；隱性感染組HLA—A2基因分布頻率為51.7％(31/60)；攜帶組H

4、LA—A2基因分布頻率為49.1％(26/53)；對照組HLA—A2基因分布頻率為50.0％(15/30)，各組間HLA—A2基因分布頻率無顯著差異(P＞0.05)。 2．各組HLA—A2陽性者特異性CTL功能的ELISPOT撿測結果： (1)各組對兩條多肽的應答比例相似；隱性感染組對兩條多肽的應答比例明顯高于顯性感染組(P＜0.05)；兩組顯著高于無癥狀攜帶組和對照組(P＜0.05)；而后兩組間無統(tǒng)計學差異(P＞0.0

5、5)。 (2)各組對兩條多肽的平均反應強度相似；隱性感染組對兩條多肽的平均反應強度明顯高于顯性感染組(P＜0.05)；兩組顯著高于無癥狀攜帶組和對照組(P＜0.05)；而后兩組間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。 3．組間比較，治療后完全應答組對兩條多肽的應答比例和平均反應強度均明顯高于不完全應答組(P＜0.05)；治療前兩組無顯著統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。組內比較，治療后完全應答組應答比例和平均反應強度均明顯高于治療前(

6、P＜0.05)；不完全應答組治療前、后無顯著差異(P＞0.05)。 結論： 1．各組間HLA—A2基因分布頻率無差別。HBV感染表現(xiàn)形式或轉歸與HLA—A2基因分布無明顯關系。 2．不同表現(xiàn)形式的HBV感染者外周血HBcAg特異性CTL經(jīng)特異性抗原多肽(HBcAg18-27V/I)刺激后分泌。IFN—γ的水平不同，隱性感染者的自愈和清除病毒可能與其應答水平較高有關。 3．核苷類藥物抗病毒治療可增強HBcA