大麗輪枝菌VdLac基因的克隆與功能分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、大麗輪枝菌是一種典型的土傳病原真菌，寄主范圍廣泛。微菌核是大麗輪枝菌的主要休眠結構，抗逆性強，可在沒有寄主的情況下存活14年，這與其體內含有豐富的黑色素密切相關。黑色素是一種由酚類或吲哚類化合物組成的帶有負電荷的疏水性高分子聚合物，能夠保護真菌免受環(huán)境和寄主的影響。漆酶是黑色素合成通路中的關鍵酶，在真菌生長發(fā)育的過程中發(fā)揮著重要的作用。本文通過農桿菌介導的遺傳轉化和PEG介導的原生質體轉化方法對大麗輪枝菌中的漆酶基因VdLac進行了敲除

2、和互補，研究漆酶基因在大麗輪枝菌中的主要功能。結果如下:
　　1.根據NCBI上已公布的VdLs.17的基因組序列，克隆得到漆酶基因VdLac序列，VdLac基因全長1978 bp，cDNA序列全長1713 bp，編碼570個氨基酸。
　　2.利用農桿菌介導的遺傳轉化方法(ATMT)對VdLac進行敲除，并通過潮霉素抗性篩選和PCR檢測確定陽性敲除突變體，獲得了4個敲除突變體。
　　3.通過PEG介導的原生質體轉化方法

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